实验室常用知识，使用Tris缓冲剂的注意事项！

发布时间：2023-11-09

生物缓冲剂在生物化学研究中有着重要的意义，在免疫印迹、生物芯片及生物杂交等实验及体外诊断、生物医药等行业中的应用非常多。

 

生物缓冲剂系统包含几十个品种。典型品种如Tris、HEPES等。本文将介绍Tris缓冲剂使用注意事项。

 

注意事项：

 

1.Tris缓冲液的pH值受温度影响大，△pKa／℃＝－0.031 ，例如：4℃时缓冲液的pH＝8.4，则37℃时的pH＝7.4，所以一定要在使用温度下进行配制，室温下配制的Tris-HCl缓冲液不能用于0℃～4℃。

 

2.Tris缓冲液对某些pH电极发生一定的干扰作用，需使用与Tris溶液具有兼容性的电极；

 

3.Tris缓冲液的pH值受溶液浓度影响较大，缓冲液稀释十倍，pH值的变化大于0.1

 

4. 吸入，摄入，皮肤吸收Tris可造成伤害，操作时需戴好手套和护目镜；

 

5. Tris缓冲液易吸收空气中的CO2，配制的缓冲液要注意盖严密封；

 

6. Tris在一定程度上与各种分子反应，包括RNA酶抑制剂，醛，酶，DNA以及常见金属如Cr3+，Fe3+，Ni2+，Co2+和Cu2+等，在有些系统中会起抑制作用，在配制过程中需考虑与其他组分之间的相互作用；

 

7. Tris缓冲液不适用于BCA测定；

 

8. 作为蛋白缓冲液时，若后续工作需要质谱，则不适宜用Tris，较好换成其他质谱仪可耐受的缓冲液。

 

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