药研干货 | 疫苗乳佐剂产品全景分析（下）

AF03是由赛诺菲巴斯德开发的水包油疫苗佐剂。其商业配方含有角鲨烯油相、PBS水相和表面活性剂聚氧乙烯鲸蜡醚和Span85，Dv50约为90 nm。与诺华疫苗诊断公司销售的MF59疫苗和葛兰素史克生物制品公司销售的AS03流感疫苗不同，AF03是通过微流体化将角鲨烯在水中制备成乳状液，通过相变温度（PIT）乳化工艺生产的。尽管AF03已被报道在动物模型中增强体液和细胞免疫反应，但其机制仍在很大程度上不清楚。

根据赛诺菲巴斯德在相关专利中的描述，AF03免疫佐剂乳液的成分组成如下表5所示。

表5 AF03成分组成

AF03是赛诺菲巴斯德开发的高性价比O/W乳佐剂，具有核心专利，专利将于2026年7月到期。

2010年6月8日，欧盟委员会为医药产品Humenza（大流行性流感疫苗 （H1N1）（裂解病毒粒子、灭活、佐剂））颁发了在整个欧盟有效的附条件上市许可，该产品被批准用于预防官方宣布的甲型H1N1流感病毒大流行。上市许可持有人（MAH）是Sanofi Pasteur S.A.。2011年5月5日，欧盟委员会又收到MAH 决定出于商业原因自愿撤销上市许可的信函。Humenza未在任何欧盟国家销售。2011年6月14日，欧盟委员会撤销了Humenza的上市许可。

H1N1大流行性流感疫苗：Humenza是一种通过注射给药的疫苗。它包含已被灭活的流感病毒的部分，一种称为A/California/7/2009（H1N1）样菌株（NYMC X-179A）的流感毒株。

Humenza由两个小瓶组成：一个小瓶含有抗原（悬浮液）和一个小瓶含有佐剂，在给药前混合。

AddaVax^TM是InvivoGen公司开发的一种基于角鲨烯的水包油纳米乳剂，其配方类似于MF59的配方，可引发细胞（Th1）和体液（Th2）免疫反应。这类佐剂被认为通过募集和激活抗原呈递细胞以及刺激巨噬细胞和粒细胞产生细胞因子和趋化因子起作用。

AddaVax^TM纳米乳与MF59佐剂组成相似，并且同样使用微射流生产。通过0.22 um过滤器过滤，以去除大液滴并对最终产品进行除菌。产品粒径约为160 nm。

表6 AddaVaxTM成分组成

目前AddaVax佐剂仅有InvivoGen公司。

1、H5N8 禽流感病毒疫苗

有团队对AddaVax佐剂H5N8灭活疫苗诱导针对H5病毒不同的体液免疫反应做了研究，结果显示，AddaVax 佐剂H5N8灭活疫苗可以刺激小鼠产生更强的保护性免疫反应，IgG抗体、血凝抑制（HI）、神经氨酸酶抑制（NI）和微量中和（MN）抗体滴度高于含Al（OH）₃佐剂或无佐剂的疫苗制剂，并达到减量效果。此外，AddaVax佐剂制剂在HI抗体中也表现出针对H5病毒不同分支的强效交叉反应反应。AddaVax佐剂可以显著增强H5N8灭活疫苗的免疫原性。

2、流感和新冠病毒联合疫苗

在一项研究中，研究人员开发了一种流感和新冠病毒联合疫苗，包括流感病毒血凝素（HA）蛋白和新冠病毒刺突（S）蛋白，采用AddaVax制剂。研究人员对K18-hACE-2转基因小鼠进行了肌肉注射疫苗，包括联合疫苗或单独的流感（HA）或新冠（S）重组蛋白疫苗。结果显示，流感和新冠病毒联合疫苗可以通过防止体重下降和临床症状的进展来保护小鼠免受流感和新冠病毒的挑战。流感和新冠病毒联合疫苗产生的保护性免疫反应与单独的流感或新冠重组蛋白疫苗产生的反应相当。

Freund's佐剂在20世纪40年代由Jules Freund发明的第一个油包水佐剂。它是一种由石蜡油和羊毛脂制备的稳定油包水乳液，弗氏佐剂可以使抗原持续缓释，同时又能非特异性地增强机体对抗原的特异性免疫应答，增强相应抗原的免疫原性或改变免疫反应类型。

完全弗氏佐剂(Complete Freund's Adjuvant,CFA) 含有结核分枝杆菌，可显著增强体液和细胞免疫，诱导Th1细胞因子（IL-2、INF-γ、TNF-α、TNF-β等）的产生，并介导特异性细胞免疫反应。增强免疫反应的能力更强，一般用于初次免疫。不完全弗氏佐剂（Incomplete Freund's Adjuvant ,IFA)不含结核分枝杆菌，IFA 诱导 Th2 细胞因子（IL-4、IL-5、IL-6、IL-10 和 IL-13）的产生。这些细胞因子激活B淋巴细胞并介导基于抗体的体液免疫。一般用于初次免疫后的加强免疫，这样可以避免完全弗氏佐剂的副作用，同时有利于产生高效价的抗体。

与第一种人用疫苗佐剂铝佐剂相比，弗氏佐剂在提高抗体滴度和免疫持久性方面具有优势。但容易引起注射后油相长期滞留在组织中的严重不良反应，可引起注射部位溃疡、无菌化脓、肉芽肿，易引起过敏反应。

图2 弗氏佐剂包装示意图

弗氏佐剂由液体石蜡与羊毛脂混合而成，组分比为1～5：1，可根据需要而定，通常为2：1。根据加或不加结核分枝杆菌（最终浓度为2～20 mg/ml）可以分为完全弗氏佐剂和不完全弗氏佐剂。

表7 弗氏佐剂分类组成

弗氏佐剂市场竞争格局分散，Sigma-Aldrich、Thermo Fisher Scientific和Charles River Laboratories等主要参与者占据重要的市场份额。弗氏佐剂市场的主要竞争对手之一是Sigma-Aldrich，公司提供多种弗氏佐剂。Sigma-Aldrich拥有全球业务和强大的分销网络，这使其能够接触到广泛的客户。弗氏佐剂市场的另一个主要竞争对手是Thermo Fisher Scientific，该公司提供全系剂，包括FCA、FIA和FIA-MTB。Thermo Fisher Scientific拥有良好信誉和广泛的客户群，这使其在市场上具有竞争优势。

据WISEGUY市场研究报告，2023年Freund's佐剂市场规模估计为3.13（十亿美元），预计至2032年将增长至5.2（十亿美元），预测期内（2024~2032年）符合年增长率为5.8%。在临床前测试和药物开发需求不断增长的推动下，动物模型的全球弗氏佐剂市场预计在未来几年稳定增长。

Freund's佐剂目前只能用于动物免疫。CFA和IFA广泛应用于实验免疫学。CFA是一种常用的致炎剂，被广泛应用于脚掌皮肤、踝关节炎症痛等慢性疼痛模型的制作。另外，CFA也应用于兽医疫苗接种。

Montanide ISA系列是法国SEPPIC公司开发的系列佐剂，根据油水相类型与比例又可分为以下三类。

该系列是连续的油相乳液。根据预期的疫苗特性选择佐剂的油相类型与比例（50%~70%）。

该系列产品分为两种，一种是含矿物油的，产品名为MONTANIDE? ISA 61 VG、70 VG、71 VG等，另一种是含非矿物油的，产品名为MONTANIDE? ISA 763A VG、763B VG、660 VG。与不完全弗氏佐剂相比，该系列乳剂黏度较低。

MONTANIDE? ISA O/W系列主要应用于禽类、牛和小反刍动物、鱼类和猪。

MONTANIDE? ISA 51和ISA 720是用于人用治疗性疫苗的新一代油包水乳化佐剂。MONTANIDE? ISA 51 VG油相与水相的比例为50：50，已被批准用于人体临床应用，主要用于癌症和艾滋病疫苗接种试验。可以产生抗原储备效应，增强CD4+与CD8+ T细胞的反应，也可以增强针对癌症抗原的抗体反应。ISA 720是植物来源的非矿物油与甘露醇单油酸酯家族表面活性剂的混合物。ISA 720油水相比为70：30，主要用于疟疾疫苗计划的健康志愿者。

该系列是水包油乳剂，根据疫苗的预期特性调整油相的类型与比例（10%~25%）。

该系列产品分为两种，一种是含矿物油的，产品名为MONTANIDE? ISA 15A VG，另一种是含矿物油与非矿物油的，产品名为MONTANIDE? ISA 28R VG。

MONTANIDE? ISA O/W主要应用于猪。

该系列是水包油包水的双重乳液，作为佐剂使用时比例为50：50（重量比）。

该系列产品分为两种，一种是含矿物油的，包括MONTANIDE? ISA 201 VG与206 VG，另一种是含非矿物油的，MONTANIDE? ISA 207 VG。

MONTANIDE? ISA W/O/W主要应用于牛羊等小反刍动物与猪。

SEPIVAC SWE^TM是法国SEPPIC公司开发的人用预防性疫苗佐剂，已经被用于各种临床前和临床研究，并被证明是一种安全高效的疫苗佐剂，适用于多种抗原。目前已在CDE备案登记。SEPIVAC SWE^TM能够增强抗原摄取和呈递，增强高亲和力抗体的产生，促进Th1和Th2免疫反应，减少抗原使用剂量。

图3 SEPIVAC SWE^TM包装示意图

SEPIVAC SWE^TM与MF59成分相似。

表8 SEPIVAC SWETM组成

1、COVID-19候选疫苗

SEPIVAC SWE^TM已被用于制备各种候选疫苗，在一项临床试验中，加拿大VIDO-InterVac开发的COVID-19候选疫苗，是含SEPIVAC SWE^TM的疫苗首次在人体中使用。

2、H5N1与H7N9裂解疫苗

SEPIVAC SWE^TM与H5N1与H7N9裂解抗原混合制成疫苗已被证实在动物试验中显示出较高的效价。

艾伟拓作为药用辅料供应商，始终聚焦高端制剂市场需求，致力于为中国制药企业提供优质、安全的药用辅料解决方案。为疫苗研发客户提供以下核心产品：
QS-21， CAS号：141256-0404 ，CDE登记号F20250000075
QS-7，CAS号：208933-54-4
QS-17
QS-18
QS-ANM
MF59
CpG ODN1018(HP) ，CAS号：937402-51-2
CpG ODN7909(HP)
CpG ODN9008(HP)