2025年7月16日，中国科学院上海药物研究所张继稳团队在Journal of Controlled Release在线发表了题为“Alleviation of dry eye disease with lyophilized extracellular vesicles”的研究论文。
干眼病（DED）是一种常见的眼部疾病，全球数以百万计的人群受到影响，亟需开发新的治疗策略，实现有效治疗。细胞外囊泡（EVs）对DED有治疗潜力，但因储存稳定性等问题限制了临床应用。
该研究提出一种新的策略，首次将天然渗透调节剂依克多因（ectoine）作为保护剂，应用于牛乳源细胞外囊泡（mEVs）的冻干处理，对冻干后mEVs的稳定性进行评价，并将冻干mEVs应用于DED的治疗研究。
1.依克多因对细胞外囊泡具有冻干保护作用
该研究通过测定β-半乳糖苷酶（β-Gal）活性评估mEVs稳定性（图1 A-C），结果显示冻干处理后，依克多因组显著提高了β-Gal酶活性的保留。荧光共振能量转移（FRET）分析显示（图1 E-G），1.5%依克多因能维持DiO/DiI共标记mEVs的稳定能量转移效率。长期稳定性实验结果（图1 H，I）显示，不做任何处理的mEVs在4℃储存60天后，粒径明显增大，且颗粒数减少，而冻干mEVs在同样条件储存后粒径和颗粒数变化最小。
图1 冻干mEVs的稳定性分析
在体外细胞实验中，冻干mEVs能有效保护人角膜上皮细胞免受高渗条件损伤。因此，依克多因能维持mEVs冻干后的结构稳定性，是一种极具潜力的细胞外囊泡（mEVs）冻干保护剂。
2.冻干细胞外囊泡的药效学评估
该研究将冻干mEVs应用于DED的治疗进行药效学评估。采用0.15%苯扎氯铵（BAC）诱导新西兰兔DED模型，将造模的新西兰兔分为模型组（PBS）、单独依克多因组和冻干mEVs组。角膜染色评分显示（图2 C，D），冻干mEVs组角膜染色评分（1.50±1.64）显著低于单独依克多因组（4.80±2.40）和模型组（6.50±5.17），说明其促进角膜上皮修复的效果更优。泪液分泌测量显示（图2 B），冻干mEVs组（11.5±1.64mm）和单独依克多因组（11.0±1.29mm）均显著高于PBS组（6.00± 0.91mm），接近正常水平（13.2±2.12mm），表明冻干mEVs能促进DED兔的角膜和结膜修复，促进泪液分泌。
图2冻干mEVs对兔DED的治疗效果
3.小结
依克多因（Ectoin，1,4,5,6-四氢-2-甲基-4-羧酸） 为天冬氨酸的衍生物。目前已用于海露亦蔻®等滴眼液中，具有修复眼部损伤，具有保湿、抗炎、抗过敏、修复和再生的作用，可以稳定泪膜，减少发炎和过敏的作用。除此之外，在鼻喷、喉喷中也有相关应用。
外泌体（exosomes）属于细胞外囊泡（EVs）的一个亚型。近几年，外泌体凭借优异的生物相容性、低免疫原性、天然跨屏障能力以及可装载蛋白、核酸、小分子药物的多重优势，在药物递送领域展现出巨大的应用潜力。
但外泌体脂质双分子层结构对环境条件高度敏感，液态制剂极易发生囊泡聚集、膜破裂、内容物泄露与生物活性衰减；现有保存方式高度依赖－80℃超低温冷链，反复冻融还会进一步破坏其理化性质与生物学功能，严苛的储运条件显著制约其从实验室走向产业化与临床转化。因此，开发可摆脱深度冷链、实现长期稳定储存的外泌体冻干制剂，是突破外泌体药物递送产业化瓶颈亟待解决的关键方向。
上述研究证明依克多因作为冻干保护剂，可有效保存EVs的结构和生物学活性，为EVs的稳定储存提供了解决方案。不难推断，依克多因有潜力作为外泌体（exosomes）的冻干保护剂。这或许是外泌体相关企业制剂研发人员值得考虑和尝试的一个方向。
艾伟拓全新推出注射级依克多因，已完成CDE登记并公示，登记号 F20260000188。GMP级别现货供应，高纯低杂，严控微生物限度，助力新型眼用制剂及外泌体制剂研发生产！
