在制备粒径小于200 nm、多分散系数(PDI)≤0.25且具备良好稳定性的脂质体。为优化脂质体的制备工艺,系统考察了微流控技术中的若干关键参数,包括总流速(TFR)、流速比(FRR)、磷脂类型以及磷脂与胆固醇的比例。结果表明,在大多数处方中,当TFR在1~3 ml·min?1范围内变化(除TFR为3 ml·min?1外),对脂质体粒径影响较小;在相同FRR条件下,增加或降低TFR可获得相近粒径的脂质体,该趋势与先前研究一致。此外,TFR对脂质体制剂的PDI具有显著影响,随着TFR升高,PDI值增大,这也与文献报道一致。TFR的增加还会影响制剂的稳定性,当TFR提高至2 ml·min?1时,稳定性有所下降。FRR与脂质体粒径呈负相关关系;将FRR从1∶2提高至1∶4,有助于减少脂质体聚集,制得粒径更小的脂质体,与已有研究趋势相符。同时,FRR与PDI值呈负相关,提高FRR可降低部分样品的PDI值。FRR的增加亦有助于提升脂质体制剂的稳定性,1∶4处方较1∶2处方表现出更优的稳定性。
采用多种脂质制备脂质体;使用DMPC、DPPC、DSPC、DOPC研究不同碳链长度对脂质体直径及稳定性的影响。DSPC和DOPC具有相同的烃链长度,但烃链饱和度不同;双键(C=C)存在于DOPC链中。此外,脂质(DMPC Tm 23℃,DPPC Tm 42℃,DSPC Tm 55℃,DOPC Tm?17℃)的转变温度的变化是另一个特性,研究其对处方稳定性的影响。提高磷脂酰基长度和转变温度(DSPC>DPPC>DMPC),脂质体直径增大。
PDI平均值与脂质体大小(DSPC>DPPC>DMPC)变化趋势相同;不同脂质处方PDI平均值均为DMPC(0.22),DPPC(0.23),DOPC(0.27),DSPC(0.40)。脂质类型也影响处方的稳定性;DPPC和DMPC处方比DSPC和DOPC处方更稳定。磷脂与胆固醇联用可以提高脂质体的稳定性,改变脂质体的刚性;胆固醇是一种刚性类固醇,具有调节脂质链排列和减少囊泡结构不稳定性的能力。两种磷脂与胆固醇的比例(2∶1和3∶1)可以为脂质体提供了期望的直径和稳定性;磷脂与胆固醇比例为2∶1时,脂质体尺寸更小,更均匀,PDI更低。采用相同的制备参数,分别用DMPC,DPPC,DSPC和DOPC制备脂质体并用DLS进行表征,以筛选脂质。
乙醇被用作极性溶剂,它可扩散到水相并触发脂质体的自组装。先前的研究表明,由于乙醇的收缩效应(shrinkage effect),乙醇对降低脂质体直径有显著影响。此外,其他研究表明,乙醇能够改变体系的净电荷,并为其提供一定的空间稳定性,从而导致平均颗粒直径的减小。